液相色谱仪的检测原理是基于混合物中各组分在液 - 固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行分离后分析鉴定。具体过程如下:
进样系统:将待分离的样品以微量注入液相色谱柱中。进样系统有进样器和自动进样器等类型,自动进样器可自动完成多个样品的连续进样操作。
色谱柱:是实现色谱分离的核心部分,通常由不同的填料(如各种材料的颗粒)填充而成,也有开放式管道(开放管柱)。当样品进入柱子后,样品分子与填料发生分配、吸附等相互作用,从而实现分离。不同的物质由于与固定相的相互作用不同,在色谱柱中的保留时间也不同,进而实现分离。
移相系统:主要由流动相(液相)的泵、溶液容器、控制器等组成,负责将流动相送入柱子,并在柱子中进行分离。液相色谱中的移相方式有梯度洗脱法、等温洗脱法、等时洗脱法等。
检测器:用于检测某个化合物在液相色谱柱中的存在与否及其相对浓度的大小。常见的检测器有紫外吸收检测器、荧光检测器、电化学检测器等。当样品成分经过检测器时,检测器将其信号转化为电信号,通过放大、滤波等处理后,传输到计算机系统。
数据处理系统:由计算机、色谱软件等组成,可以对检测结果进行数据处理和分析,如生成色谱图、峰面积计算、峰高度计算、定量分析等。
总之,液相色谱仪利用各组分在固定相和流动相之间的分配和吸附等物理化学作用的差异,使样品在色谱柱中被分离成不同的成分,再通过检测器和数据处理系统进行检测和分析。