液相色谱仪怎样操作？

液相色谱仪的操作通常包括一系列步骤，这些步骤确保了仪器的正常运行和实验结果的准确性。以下是一个基本的液相色谱仪操作流程：

一、开机与准备

打开电源：首先，打开液相色谱仪的电源，并启动计算机和相关软件（如Bootp Server等）。

打开组件电源：自上而下打开液相色谱仪的各个组件电源，确保所有设备均处于工作状态。

冲洗泵头：使用10%异丙醇溶液冲洗泵头，以去除可能存在的杂质和气泡。控制流量大小，以能流出的*小流量为准。

检查流动相：注意检查各流动相所剩溶液的容积设定，确保不会因容积过低而自动停泵。同时，及时补充洗泵溶液的体积。

二、系统冲洗与平衡

冲洗系统：使用所选的流动相冲洗系统一定时间，以确保系统的稳定性和准确性。如果所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相。

开启检测器灯：在正式进样分析前30分钟左右开启检测器灯（如D灯或W灯），以延长灯的使用寿命。

三、建立色谱操作方法

设置方法：在软件中建立色谱操作方法，包括选择合适的柱子、流动相组成和流速等参数。注意保存为自己命名的Method，避免覆盖或删除他人的方法及实验结果。

进样设置：如果使用手动进样器，需在进样前和进样后用洗针液洗净进样针筒。洗针液一般选择与样品液一致的溶剂。进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡。

四、运行与分析

启动泵：启动高压泵，确保流动相在系统中流动。

开始分析：启动液相色谱仪的分析程序，观察色谱图并记录数据。根据色谱图解释和分析结果。

五、维护与清洁

冲洗管路：实验结束后，使用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。这有助于去除残留的样品和杂质，保持系统的清洁和稳定性。

关闭设备：先关闭泵、检测器等组件，再关闭工作站和计算机。*后自下而上关闭液相色谱仪的各组件电源。

六、注意事项与故障排除

压力监控：在运行过程中，要密切注意压力的变化。如果压力很小，可能是管件连接处有漏；如果压力非常高，可能是管路已堵。应及时检查并排除故障。

基线观察：基线应平稳无异常。如果出现不规则噪声或漂移，可能是系统不稳定、流动相被污染或色谱柱被污染等原因。应检查并采取相应的措施进行解决。

样品制备：样品需过滤处理，以防止堵塞仪器或影响分析结果。同时，要确保样品的纯度和稳定性。

数据文件管理：设定合适的数据文件存放路径，并在运行结束后关闭灯源待机。这有助于保护数据和设备的安全。

此外，在操作过程中还需注意以下几点：

在更换流动相时，要充分排空并留意压力变化。同时及时更换过滤白头以防止堵塞。

定期检查废液桶容量，确保有足够空间容纳废液。

遵循实验室安全规定，使用个人防护设备如实验室衣物、手套和护目镜等。

总之，液相色谱仪的操作需要严格按照规范进行，以确保实验结果的准确性和仪器的长期稳定运行。